动物血清鉴别方法与动物血清保存方法
培养基需要在细胞培养过程中使用。有些培养基需要合成培养基和动物血清。有些细胞只有加入血清才能正常分裂。因此,动物血清也是研究人员经常使用的产品。然而,我们仍然对动物血清的识别方法、保存方法和用途知之甚少。应该如何识别?
动物血清鉴别方法:
血液凝固沉淀的淡黄色透明液体。如果将血液从血管中取出,放入试管中,没有抗凝剂,凝血反应会被激活,血液会迅速凝固,形成果冻。周围沉淀的淡黄色透明液体是血清,凝血后也可以通过离心获得。在凝血过程中,纤维蛋白原转化为纤维蛋白块,所以血清中没有纤维蛋白原,这与血浆不同。
在凝血反应中,许多物质被释放出来,每个凝血因子都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续改变。例如,凝血酶原变成凝血酶,随着血清的储存时间逐渐减少甚至消失。这些也和血浆不一样。然而,大量未参与凝血反应的物质与血浆基本相同。为了避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析都是以血清为样品的。
保存动物血清的方法:
长时间保存的血清应该储存在-20。℃-70℃在低温冰箱里℃不要在冰箱里保存超过一个月。因为血清结冰时体积会增加10%左右,所以在冷冻到低温冰箱之前,血清会预留一定的体积空间,否则很容易被污染或者玻璃瓶冻裂。
2.一般厂家提供的血清是无菌的,不需要过滤杀菌。如果发现血清有悬浮物,可以在培养液中加入血清一起过滤,不要直接过滤血清。
血清解冻:瓶装血清解冻需要采用逐步解冻法:-20℃至-70℃将血清放入低温冰箱4℃在冰箱里溶解一天。然后移入室温,全部溶解后重新包装。在溶解过程中,需要轻轻摇晃均匀(注意不要造成气泡),使温度和成分均匀,减少沉淀。不要直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样由于温度变化过大,很容易导致蛋白质凝聚而沉淀。
热灭活指的是56℃,30分钟加热已经完全解冻的血清。在加热过程中,规则务必均匀摇晃。这种热处理的目的是使血清中的补充成分(complement)灭活。由于热处理会导致血清沉淀物显著增多,所以一般不建议进行这种热处理。
